المحتوى
إن المركبات الكيميائية بروميد سيتيل إيثيل إيثيل الأمونيوم وبروميد سداسي إيثيل إيثيل الأمونيوم وبروميد بالميثيل ثلاثي إيثيل الأمونيوم وبروميد السيتريونيوم كلها معروفة أيضًا بواسطة CTAB. يتم استخدام المادة الكيميائية كحافظ على درجة الحموضة في الجينوم المتسلسل للحمض النووي ، وخاصة النباتات.
صيغة CTAB
تختلف كميات الصيغ المختلفة للمواد الكيميائية CTAB اعتمادا على المختبر. ومع ذلك ، تشتمل جميع المكونات على 1 M Tris HCl pH 8.0 و 0.5 M EDTA و 5 M NaCl و H2O (في بعض الأحيان تقطير مرتين). بالنسبة للمكون CTAB ، تستخدم بعض المختبرات بروميد سيتيل إيثيل الأمونيوم وغيرها من بروميد سداسي إيثيل الأمونيوم.
تحضير الأنسجة النباتية
قد يختلف تحضير الأنسجة النباتية حسب المواد. يجب كسر الجدران والأغشية الخلوية للوصول إلى المواد النووية دون أي تدهور. عادة ، في الطحن ، المواد النباتية مع النيتروجين السائل يسمح بالوصول إلى الحمض النووي ، والحفاظ على الإنزيمات الخلوية الضارة والمواد الكيميائية غير النشطة.
التعليق والطرد المركزي
يتم وضع الأنسجة المسحوقة على شفرة CTAB وإدخالها في وعاء من الماء الجاري. ثم يتم خلطها بالكلوروفورم وطردها لفصل البروتينات الذائبة والمواد الأخرى. ثم يتم ترسيب الحمض النووي من المرحلة المائية وغسله بعناية لإزالة الأملاح الملوثة. ثم يتم سحب الحمض النووي المنقى وتخزينه على شريحة TE أو الماء المقطر المعقم.